本文意欲包括所有個別對映異構物，以及式及式化合物之對映異構物之混合物(包括外消旋體)。 副甲狀腺增生 在一些實施例中，式化合物或其醫藥學上可接受之鹽、非晶形式、多晶形式或醫藥組合物(例如本文所描述之任一種固體或液體調配物)針對RET激酶展現的選擇性為另一激酶的至少30倍。 副甲狀腺增生 舉例而言，式化合物或其醫藥學上可接受之鹽、非晶形式、多晶形式或醫藥組合物(例如本文所描述之任一種固體或液體調配物)針對RET激酶展現的選擇性為另一激酶的至少40倍；至少50倍；至少60倍；至少70倍；至少80倍；至少90倍；至少100倍；至少200倍；至少300倍；至少400倍；至少500倍；至少600倍；至少700倍；至少800倍；至少900倍或至少1000倍。
一般熟習此項技術者將瞭解，此體現化合物或組合物含有約1 mg至約5 mg、約5 mg至約10 mg、約10 mg至約15 mg、約15 mg至約20 mg、約20 mg至約25 mg、約25 mg至約30 mg、約30 mg至約35 mg、約35 mg至約40 mg、約40 mg至約45 mg或約45 mg至約50 mg活性成分。 在一些實施例中，本文提供的組合物含有約10 mg活性成分。 應瞭解，為了清楚起見而在單獨實施例之情形中描述的本發明之特定特徵亦可以組合形式提供於單一實施例中。
將合併之有機萃取物用飽和NaCl水溶液洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。 將殘餘物藉由逆相Combi急驟層析在以下條件下純化：管柱，C18；移動相，於H2O中之ACN (0.1% NH4CO3)，在25 min內用0%至50%之梯度溶離；UV 254 nm，得到呈白色固體之標題化合物(100 mg，80.02%)。 ES/MS (m/z) 453.4 (M+H)。 向於DCM (1.45 mL)中之N-[4-胺甲醯基-5-[6-[2-[[3-(1,1-二甲基丙基)異㗁唑-5-基]胺基]-1-甲基-2-側氧基-乙基]-3-吡啶基]-2-異丙基-吡唑-3-基]胺基甲酸三級丁酯(134 mg，0.242 mmol)添加TFA (0.72 mL，9.68 mmol)。
如本文所用，術語「個體」、「個體」或「患者」可互換使用，係指任何動物，包括哺乳動物，諸如小鼠、大鼠、其他嚙齒動物、兔、犬、貓、豬、牛、綿羊、馬、靈長類動物及人類。 在一些實施例中，個體已經歷及/或展現待治療及/或預防之疾病或病症之至少一種症狀。 在一些實施例中，個體已鑑別或診斷患有癌症，諸如乳癌、肺癌及/或具有RET基因、RET蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調之癌症(RET相關癌症) (例如，如使用管理機構批准，例如FDA批准之分析或套組或實驗室研發之測試所測定)。 在一些實施例中，個體具有對RET基因、RET蛋白質或其中任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性之腫瘤(例如使用管理機構批准之分析或套組測定)。 個體可為患有腫瘤的個體，該腫瘤對RET基因、RET蛋白質或其任一者之表現或活性或含量之失調呈陽性(例如使用管制機構批准，例如FDA批准的分析或套組鑑別為陽性)。
本發明亦提供一種治療癌症之方法，其包含向有需要之個體投與包含式I化合物(亦即塞爾帕替尼)或其醫藥學上可接受之鹽、非晶形式或多晶形式及鉑劑的組合物。 在另一實施例中，該醫藥組合物進一步包含一或多種醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。 本文亦提供式及式之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中A、R1、n、X1、X2、X3、X4及R2如針對式所定義。 如本文所用，術語C3-C7環烷基意謂含有三至七個碳原子之環烷基分子。 C3-C7環烷基之實例包括(但不限於)環丙基、環丁基及環戊基。 類似地，如本文所用，術語C4-C7環雜烷基意謂如本文所定義之環烷基分子，其含有四至七個總原子且包括一或多個在環烷基鏈中具有經置換碳之雜原子。
- 特定對映異構物可以手性試劑開始或藉由立體選擇性或立體特異性合成技術來製備。
- 藉由「早期癌症」或「早期腫瘤」意謂不為晚期或轉移性或經分類為0、I、或II期癌症之癌症。
- 治療RET相關疾病或病症(諸如IBS或癌症)之另一種方法包括a)偵測來自患者之樣品中之RET基因、RET激酶或其任一者之表現或活性或含量之失調；及b)投與治療有效量之式I化合物或醫藥學上可接受之鹽。
- 儘管已在診斷及治療多種類型之癌症，包括RET (轉染重排)相關癌症，中取得進展，但治療仍為一種挑戰。
- 在一些實施例中，個體之臨床記錄表明，個體患有其中RET基因、RET蛋白質或其任一者之表現或活性或含量存在失調之腫瘤(且視情況，臨床記錄表明該個體應用本文所提供之組合物中之任一者進行治療)。
RET激酶之胞外部分含有四個涉及配位體結合之鈣依賴性鈣黏蛋白樣重複序列及RET胞外域正確摺疊所需之近膜富含半胱胺酸之區，而該受體之細胞質部分包括兩個酪胺酸激酶子域。 化合物16可藉由使化合物14與化合物15 (其中環D如上文所定義且P 1為胺基保護基)在適當S NAr條件下(例如視情況在諸如K 2CO 3之鹼存在下及在高溫下)偶合來製備。 其中波浪線指示環D連至包含X 1、X 2、X 3及X 4之環的連接點，且星號指示連至P 1之連接點；X 1、X 2、X 3及X 4如上文所定義；P 1為胺基保護基；Z為-B且R x及R y為H或(1-6C)烷基，或R x及R y連同其連接之原子形成5員至6員環，視情況經1至4個選自(C1-C3烷基)之取代基取代)。 接著，化合物12可藉由以下自化合物11製備：在標準條件下移除保護基P 1(例如可藉由在酸性條件，例如HCl下處理化合物11來移除Boc基團)，隨後在標準條件下官能化(亦即使化合物11與適當的試劑反應或用適當的試劑處理化合物11)以引入E基團。 術語「活化突變」描述RET激酶基因中之突變，其引起例如與野生型RET激酶相比具有增加之激酶活性的RET激酶之表現，例如在相同條件下分析時。 舉例而言，活化突變可引起包括RET激酶域及融合搭配物之融合蛋白表現。
此外，在此等用途中，如本文所描述之式、及之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可以約1 mg/kg至200 mg/kg之劑量向患者投與(有效劑量子範圍在上文被提及)。 如本文所描述之式、及之化合物可適用於治療罹患具有某些RET抑制劑抗性突變之癌症的患者。 舉例而言，引起對RET抑制劑之抗性增加的抗性突變，如胺基酸位置804處之取代(例如V804M、V804L或V804E)，及/或一或多種其他RET抑制劑抗性突變，如上文所述之突變，可藉由以組合形式或以先前藥物治療之後續療法形式給藥來治療。 舉例而言，若患者用第一RET激酶抑制劑治療且患者產生RET抑制劑抗性突變，則可接著用如本文所描述之式、及之化合物或其醫藥學上可接受之鹽(假定如本文所描述之式、及之化合物為所存在之特定RET激酶抑制劑突變之適合的抑制劑)後續治療患者。
由於溶解度/溶解差異，因此一些轉變影響效能及/或毒性。 另外，晶體的物理特性對於處理而言可具有重要作用；例如，一種多晶型物更可能形成溶劑合物或可能難以過濾及洗去雜質(亦即粒子形狀及大小分佈在一種多晶型物相對於另一種之間可為不同的)。 副甲狀腺增生 如本文所使用，「多晶型物」不包括化合物之非晶形式。 如本文所使用，「非晶形」係指化合物之非結晶形式，其可為化合物之固態形式或化合物之溶解形式。 舉例而言，「非晶形」係指無分子或外表面平面有規律地重複排列之化合物(例如化合物之固體形式)。
在此等用途中，生物樣品可為腫瘤樣品且腫瘤樣品可使用熟習此項技術者已知之方法(諸如基因體/DNA定序)來分析。 另外，在此等用途中，樣品可在第一次投與如本文所描述之式、及之化合物之前獲自患者。 在如本文所描述之式、及之化合物在療法中之此等用途中，可基於藉由具有RET基因、RET激酶或其任一者之表現或活性或含量的至少一種失調而選擇用於治療之患者。
術語「單位劑型」係指以單位劑量形式適用於人類個體及其他患者的物理離散單元，各單位含有經計算產生所需治療作用之預定量的活性材料(亦即式化合物或其醫藥學上可接受之鹽、非晶形式或多晶形式)，以及適合的醫藥賦形劑。 如本文所用，術語「治療」或「治療」係指治療性或姑息性措施。 有益或所需臨床結果包括(但不限於)與疾病或病症或病狀相關之症狀的完全或部分緩解、疾病程度之減輕、疾病病況穩定(亦即不惡化)、疾病進展延遲或減緩、疾病病況(例如疾病之一或多種症狀)改善或緩和以及緩解(無論部分或全部)，無論可偵測或不可偵測。 「治療」亦可意謂與不接受治療情況下之預計存活期相比，存活期延長。 本發明尤其涵蓋屬於本文所述實施例之實施例之所有組合，正如同每一者及每種組合個別地明確敍述一樣，就此而言，此類組合涵蓋可能的實施例。
在另一實例中，活化突變可為RET激酶基因之突變，該突變導致具有一或多個(例如兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個)胺基酸取代之RET激酶表現(例如本文所述之任何胺基酸取代之任何組合)，該RET激酶具有例如與野生型RET激酶相比增加的激酶活性，例如在相同條件下分析時。 在另一實例中，活化突變可為RET激酶基因之突變，其引起具有一或多個(例如兩個、三個、四個、五個、六個、七個、八個、九個或十個)胺基酸缺失的RET激酶之表現，例如與野生型RET激酶相比，例如在相同條件下分析時。 副甲狀腺增生 在另一實例中，活化突變可為RET激酶基因之突變，該突變引起具有至少一個(例如至少2個、至少3個、至少4個、至少5個、至少6個、至少7個、至少8個、至少9個、至少10個、至少12個、至少14個、至少16個、至少18個或至少20個)胺基酸插入之RET激酶表現，與野生型RET激酶，例如本文所描述之例示性野生型RET激酶相比，例如在相同條件下分析時。 如本文所用，術語「RET相關癌症」係指與RET基因、RET激酶(本文中亦稱為RET激酶蛋白質)或其中任一者之表現或活性或含量之失調相關或具有該失調的癌症。
以下流程中各步驟之產物可藉由此項技術中熟知之習知方法回收，該等習知方法包括萃取、蒸發、沈澱、層析、過濾、研磨及結晶。 試劑及起始物質係一般熟習此項技術者容易獲得的。 可使用如本文所描述之式、及之化合物及方法治療的實體腫瘤癌症類型之實例包括甲狀腺癌(例如乳頭狀甲狀腺癌、甲狀腺髓質癌)、肺癌(例如肺腺癌、小細胞肺癌)、胰臟癌、胰管癌、乳癌、大腸癌、大腸直腸癌、前列腺癌、腎細胞癌、頭頸腫瘤、神經母細胞瘤及黑色素瘤。 血液癌之其他實例包括骨髓增生病，諸如真性紅血球增多症、原發性血小板減少症及特發性原發骨髓纖維化(IMF/IPF/PMF)。 在一個實施例中，血液癌(例如作為RET相關癌症之血液癌)為AML或CMML。 副甲狀腺增生 可使用本文所描述之方法治療的癌症類型包括血液癌或實體腫瘤癌症。
將所得混合物在減壓下濃縮，用H2O 稀釋且將水層用EtOAc (2×300 mL)萃取。 將水層用6 N HCl酸化至pH 3-4，且將所得所沈澱之固體藉由過濾收集，用H2O (3×50 mL)洗滌且在真空下乾燥，得到呈淡黃色固體之標題化合物(34 g，89.0%)。 ES/MS (m/z) 299.2 (M+H)。 在室溫下於N2下向2-[4-(2,2-二氰基-1-甲氧基乙-1-烯-1-基)苯基]丙酸甲酯(400.00 mg，1.48 mmol)及(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)二鹽酸肼(210.33 mg，1.48 mmol)於EtOH (5.00 mL)中之攪拌混合物逐份添加Et3N (449.25 mg，4.44 mmol)。
舉例而言，每日之劑量處於約1 mg/kg至約200 mg/kg範圍內。 每日投與可為每日一次或呈多次劑量形式，例如每日兩次投與。 應理解，實際投與之化合物之量將由醫師根據相關情況來確定，包括待治療之病況；所選投與途徑；投與之實際的一個化合物或多個化合物；個別患者之年齡、體重及反應；以及患者症狀之嚴重程度。 在另一實施例中，n為1-4、或1-3、或1-2、或1、或2、或2-4、或2-5。 在一些實施例中，當A-n為經n取代之苯基時，兩個R1基團融合以形成包括A之部分且視情況為芳族之環結構，所得A環視情況經取代，如本文中所描述。
在一些實施例中，在細胞分析(例如，如本文所提供的細胞分析)中，相對於另一激酶量測針對RET激酶的選擇性。 在一些實施例中，式化合物或其醫藥學上可接受之鹽、非晶形式、多晶形式或醫藥組合物(例如本文所描述之固體或液體調配物中之任一者)選擇性地靶向RET激酶。 舉例而言，式化合物或其醫藥學上可接受之鹽、非晶形式、多晶形式或醫藥組合物(例如本文所描述之固體或液體調配物中之任一者)可以選擇性地靶向RET激酶而非另一激酶或非激酶標靶。 非限制性實例包括CCDC6-RET-V804M及KIF5B-RET-V804M。
本文進一步提供式I、II及III之該等化合物及其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療癌症，特定言之，用於治療具有異常RET表現之癌症(例如RET相關癌症，如甲狀腺髓質癌或RET融合肺癌)。 亦提供式I、II及III之化合物或其醫藥學上可接受之鹽在製造供治療癌症用之藥劑中的用途，特定言之，用於治療具有異常RET表現之癌症(例如RET相關癌症，如髓樣甲狀腺癌或RET融合肺癌)的用途。 亦提供使用式I、II或III之化合物、其醫藥學上可接受之鹽及其醫藥組合物治療癌症，特定言之，用於治療具有異常RET表現之癌症(例如RET相關癌症，如甲狀腺髓質癌或RET融合肺癌)的方法。 該等方法包括向有需要之患者投與治療有效量之式I、II或III之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
- 如本文所描述之式、及之化合物或其醫藥學上可接受之鹽可藉由此項技術中已知的多種程序來製備，且製備及實例如下文。
- 將殘餘物藉由逆相Combi急驟層析在以下條件下純化：管柱，C18；移動相，於H2O中之ACN (0.1% NH4CO3)，且在25 min內用0%至50%之梯度溶離；UV 254 nm，得到呈白色固體之標題化合物(130 mg，74.41%)。
- 可使用本文所描述之方法治療的癌症類型包括血液癌或實體腫瘤癌症。
- 在一些情況下，與野生型RET激酶或不包括相同突變之RET激酶相比，含有突變、插入或缺失之RET激酶更耐受一或多種第一RET激酶抑制劑對其磷酸轉移酶活性之抑制。
在一些實施例中，在酶分析(例如本文所提供的酶分析)中，量測到對野生型或V804M RET激酶的選擇性大於另一激酶。 在一些實施例中，相對於KDR激酶，本文所提供之化合物可展現針對RET激酶(例如VEGFR2)之選擇性。 在一些實施例中，觀測到針對RET激酶的選擇性超過KDR激酶，而對包括活化突變或RET激酶抑制劑抗性突變(例如守門基因突變體)之RET基因所編碼的RET激酶無效力損失。
在一些實施例中，G810S及/或G810R之抑制與針對野生型RET所觀測到之抑制類似。 舉例而言，G810S及/或G810R之抑制在野生型RET之抑制的約2倍(例如約5倍、約7倍、約10倍)內(例如，化合物針對野生型RET及G810S及/或G810R的效能類似)。 在一些實施例中，在酶分析(例如本文所提供之酶分析)中，量測到對野生型或G810S及/或G810R RET激酶的選擇性大於另一激酶。 在一些實施例中，本文所提供之化合物對RET突變體細胞展現選擇性細胞毒性。 在一些實施例中，V804M之抑制與關於野生型RET所觀測到之抑制類似。 副甲狀腺增生 舉例而言，V804M之抑制在野生型RET之抑制的約2倍(例如約5倍、約7倍、約10倍)內(亦即，化合物針對野生型RET及V804M之效能類似)。
將反應混合物用NaHCO3之冷飽和水溶液淬滅且將水層用EtOAc萃取。 將合併之有機萃取物用飽和NaCl水溶液洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮。 將粗物質藉由矽膠急驟層析用0%至5%之於DCM中之MeOH梯度溶離來純化，得到標題化合物(68 mg，61.95%)。 向3-(2,2-二甲基丙基)-1,2-㗁唑-5-胺(62 mg，0.402 mmol)、2-[4-(5-胺基-4-氰基-1-異丙基吡唑-3-基)苯基]丙酸(120 mg，0.402 mmol)及NMI (99 mg，1.206 mmol)於ACN (5.00 mL)中之混合物添加TCFH (338 mg，1.206 mmol)。 於N2下將所得混合物在50℃下攪拌2小時且接著在減壓下濃縮。
將混合物在減壓下濃縮，用H2O 稀釋且用HCl 酸化至pH 3。 將所得混合物用EtOAc (3×50 mL)萃取。 將合併之有機萃取物用飽和NaCl水溶液(2×100 mL)洗滌，經無水Na2SO4乾燥，過濾且在減壓下濃縮，得到呈淡黃色固體之標題化合物(1.2 g，96%)。 ES/MS (m/z) 353.9 (M+H)。